एक स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक विश्लेषण कैसे करें I
यह एक प्रयोगात्मक तकनीक है जो विशिष्ट समाधान में विलायकों की एकाग्रता को मापने के लिए उपयोग की जाती है, जो विलेय स्वयं द्वारा अवशोषित प्रकाश की मात्रा की गणना करते हैं। यह एक बहुत ही प्रभावी प्रक्रिया है क्योंकि कुछ यौगिकों को विभिन्न तीव्रता पर प्रकाश के विभिन्न तरंग दैर्ध्य को अवशोषित होता है। समाधान के माध्यम से गुजरने वाले स्पेक्ट्रम का विश्लेषण करके, आप विशिष्ट भंग पदार्थों और उनकी एकाग्रता को पहचान सकते हैं। स्पेक्ट्रोफोटोमीटर उपकरण है जो समाधान के विश्लेषण के लिए एक रासायनिक अनुसंधान प्रयोगशाला में उपयोग किया जाता है।कदम
भाग 1
चैंपियंस तैयार करें
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स्पेक्ट्रोफोटोमीटर चालू करें इन डिवाइसों में से अधिकांश को सटीक रीडिंग प्रदान करने से पहले गर्मी करना चाहिए। इसे शुरू करें और समाधान डालने से पहले इसे कम से कम 15 मिनट के लिए तैयार करें।
- नमूनों को तैयार करने के लिए इस समय का उपयोग करें
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ट्यूब या ट्यूब साफ करें cuvettes. यदि आप स्कूल के लिए एक प्रयोगशाला प्रयोग कर रहे हैं, तो आपके पास डिस्पोजेबल सामग्री उपलब्ध हो सकती है, जिसे साफ नहीं किया जाना चाहिए - यदि आप फिर से उपयोग करने योग्य सामग्री का उपयोग कर रहे हैं, तो सुनिश्चित करें कि आगे बढ़ने से पहले पूरी तरह से धोया जा सकता है। प्रत्येक क्युवेट को विआयनीकृत पानी से अच्छी तरह से कुल्ला।
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कंटेनर में समाधान की उचित मात्रा में स्थानांतरण करें कुछ क्यूवेट्स में अधिकतम 1 एमएल तरल होते हैं, जबकि ट्यूब में आम तौर पर 5 एमएल की क्षमता होती है। जब तक कि लेजर प्रकाश बीम तरल के माध्यम से गुजरता है और कंटेनर की खाली जगह नहीं होती, तब तक आप सटीक परिणाम प्राप्त कर सकते हैं।
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नियंत्रण समाधान तैयार करें यह विश्लेषणात्मक रिक्त (या केवल सफ़ेद) के रूप में भी जाना जाता है और विश्लेषण किए गए समाधान के शुद्ध विलायक के होते हैं - उदाहरण के लिए, अगर नमूना पानी में नमक के नमक से बना है, सफेद अकेले पानी से प्रतिनिधित्व किया जाता है यदि आपने लाल पानी डाला है, तो सफ़ेद भी लाल पानी होना चाहिए - इसके अलावा, नियंत्रण के नमूने का एक ही मात्रा होना चाहिए और उस विषय के विश्लेषण के समान एक कंटेनर में रखा जाना चाहिए।
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क्युवेट के बाहर सूखी स्पेक्ट्रोफोटोमीटर में डालने से पहले, सुनिश्चित करें कि गंदगी कणों को हस्तक्षेप करने से रोकने के लिए संभव के रूप में साफ है। एक प्रकार का वृक्ष मुक्त कपड़े का प्रयोग करें, पानी की बूंदों को मिटा दें और किसी भी धूल को निकाल दें जो बाहरी दीवारों पर जमा हो सकता है।
भाग 2
प्रयोग चलाएं
1
नमूना का विश्लेषण करने के लिए तरंग दैर्ध्य चुनें और तदनुसार डिवाइस सेट करें। यह अधिक प्रभावी विश्लेषण के साथ आगे बढ़ने के लिए एक मोनोक्रोमैटिक प्रकाश (एक तरंग दैर्ध्य के साथ) का विकल्प चुनता है। आपको प्रकाश का एक रंग चुनना चाहिए जिसे आप सुनिश्चित करने के लिए जानते हैं कि यह उन रसायनों में से एक के द्वारा अवशोषित किया जा सकता है जो आपको लगता है कि समाधान में हैं - आपके कब्जे में मॉडल के विशिष्ट निर्देशों के बाद स्पेक्ट्रोफोटोमीटर तैयार करें
- आमतौर पर, स्कूल में स्कूल की कक्षाओं के दौरान समस्या का बयान या शिक्षक तरंगदैर्ध्य के उपयोग के बारे में जानकारी प्रदान करता है।
- चूंकि नमूना हमेशा अपने रंग के सभी प्रकाश को दर्शाता है, इसलिए आपको समाधान के रंग की तुलना में एक अलग तरंग दैर्ध्य चुनना होगा।
- वस्तुएं एक निश्चित रंग के रूप में प्रकट होती हैं क्योंकि वे प्रकाश की विशेष तरंग दैर्ध्य को प्रतिबिंबित करती हैं और अन्य सभी को अवशोषित करती हैं - घास हरा है क्योंकि इसमें क्लोरोफिल समाहित होता है जिससे सभी हरे रंग की रोशनी को दर्शाया जाता है और बाकी को अवशोषित करता है।
2
मशीनरी को सफेद रंग में मिलाएं क्युवेट हाउसिंग में नियंत्रण समाधान रखें और ढक्कन बंद करें। यदि आप एनालॉग स्पेक्ट्रोफोटोमीटर का उपयोग कर रहे हैं, तो आपको एक स्नातक स्तर पर स्केल देखना चाहिए जिस पर एक सुई का पता चलता है कि प्रकाश की तीव्रता के अनुसार चलता है। जब वाद्य यंत्र में है, तो आपको ध्यान देना चाहिए कि सुई सही दिशा में पूरी तरह से कदम रखती है - ध्यान दें कि मूल्य के बाद में आपको इसकी ज़रूरत होती है - नियंत्रण समाधान को हटाने के बिना, सूचक को उचित घुंडी के साथ शून्य पर वापस लाएं। समायोजन।
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विश्लेषणात्मक रिक्त के साथ क्युवेट निकालें और कैलिब्रेशन की जांच करें। सुई स्नातक की उपाधि पर शून्य पर रहना चाहिए या डिजिटल डिस्प्ले को संख्या दिखाना जारी रखना चाहिए "0"। नियंत्रण समाधान को फिर से सम्मिलित करें और जांचें कि स्पेक्ट्रोफोटोमीटर को अच्छी तरह से समायोजित नहीं किया जा रहा पढ़ने से आपको कोई भिन्नता दिखाई नहीं देनी चाहिए।
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नमूना अवशोषण को मापें। रिक्त निकालें और मशीन में समाधान के साथ क्युवेट को सम्मिलित करें - जब तक सुई बंद नहीं हो जाती या जब तक नंबरों को बदलना बंद नहीं हो जाता तब तक लगभग 10 सेकंड प्रतीक्षा करें। ट्रांसमिशन या अवशोषण के प्रतिशत मूल्यों को नोट करें
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बाद में तरंग दैर्ध्य के साथ परीक्षण को दोहराएं। नमूने में विलायक में कई अज्ञात पदार्थ भंग होते हैं, जिनके प्रकाश अवशोषण क्षमता तरंगदैर्ध्य पर निर्भर करती है। इस अनिश्चितता को खत्म करने के लिए, एक बार में 25 एनएम की तरंगदैर्ध्य अलग करके रीडिंग दोहराएं - ऐसा करके, आप तरल में निलंबित अन्य रासायनिक तत्वों को पहचान सकते हैं।
भाग 3
अवशोषण डेटा का विश्लेषण करें
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नमूना के संप्रेषण और अवशोषण की गणना करें। ट्रांसमिशन से पता चलता है कि प्रकाश की मात्रा समाधान के माध्यम से पारित होती है और स्पेक्ट्रोफोटोमीटर सेंसर तक पहुंच जाती है। अवशोषण प्रकाश की मात्रा है जो विलायक में मौजूद रासायनिक यौगिकों में से एक द्वारा अवशोषित हो गया है। आधुनिक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर में से कई इन मात्राओं के डेटा की आपूर्ति करते हैं, लेकिन यदि आपने तीव्रता पर ध्यान दिया है, तो आपको उन्हें गणना करना होगा।
- ट्रांसमिशन (टी) को प्रकाश की तीव्रता को विभाजित करके पता लगाया जाता है जो उस नमूने के माध्यम से प्रकाश के द्वारा पारित किया गया था जो कि सफेद के माध्यम से चलाया जाता है और आम तौर पर दशमलव या प्रतिशत संख्या के रूप में व्यक्त किया जाता है। टी = आई / I0, जहां मैं नमूना के सापेक्ष तीव्रता है और मैं0 कि विश्लेषणात्मक सफेद संदर्भित
- अवशोषण (ए) ट्रांसमिशन मूल्य के आधार -10 लघुगणक के नकारात्मक के साथ व्यक्त की गई है: A = -log10टी। यदि टी = 0.1, ए का मान 1 के बराबर है (यह देखते हुए कि 0.1 10 है-1), जिसका मतलब है कि प्रकाश का 10% संचरित हो गया है और 90% अवशोषित हो गया है। यदि टी = 0.01, ए = 2 (यह देखते हुए कि 0.01 10 है-2) - परिणामस्वरूप, 1% प्रकाश प्रसारित किया गया था।
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एक ग्राफ में अवशोषण और तरंग दैर्ध्य मूल्यों की रिपोर्ट करें यह सूचकों के अक्ष पर पहले वाले और abscissas के तरंग दैर्ध्य पर पहले वाले को इंगित करता है। प्रयुक्त प्रत्येक तरंग दैर्ध्य के लिए अधिकतम शोषक के मूल्यों को दर्ज करके, आप नमूना के अवशोषण स्पेक्ट्रम का ग्राफ़ प्राप्त करते हैं - तब आप मौजूद पदार्थों को इकट्ठा करके और उनकी सांद्रता के आधार पर यौगिकों की पहचान कर सकते हैं।
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नमूने के ग्राफ़ की तुलना उन पदार्थों के साथ करें जिन्हें निश्चित पदार्थों के लिए जाना जाता है। यौगिकों का एक व्यक्तिगत अवशोषण स्पेक्ट्रम होता है और प्रत्येक बार जब वे परीक्षण किए जाते हैं, तो प्रत्येक तरंगदैर्ध्य पर हमेशा चोटी का उत्पादन करते हैं - तुलना से आप तरल में मौजूद विलायकों को पहचान सकते हैं।
आप की आवश्यकता होगी चीजें
- स्पेक्ट्रोफोटोमीटर
- किसी पदार्थ के समाधान का विश्लेषण किया जाना चाहिए
- अतिरिक्त विलायक (विश्लेषणात्मक सफेद के लिए)
- टेस्ट कन्टेनर और विश्लेषणात्मक सफेद (cuvettes, टेस्ट ट्यूब और इसी तरह)
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